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張廷青:如何正確診療防奶牛皰疹病毒2型乳頭炎?

發布時間:2020-09-08 16:03    作者:.    來源:荷斯坦雜志    查看:
    2020年8月11日晚我獲某大型奶牛養殖集團緊急技術咨詢如下:張老師咨詢個問題:我們集團現在有個牧場,泌乳牛3400頭左右。7月26日首次發病,剛開始發病10頭,其中2頭是頭胎牛,自8月1日后發病增多,泌乳牛群約30%的奶牛乳房皮膚出現不明原因的出血斑點,然后潰爛、結痂;病變僅限于乳頭基部和乳房下端皮膚和乳區皮膚;發病初期會有疼痛,結痂后很少再有疼痛發現。前、后藥浴液使用游離碘濃度分別是2500ppm/7500ppm;該場近19個月(2019年2月至2020年8月)原奶衛生質量統計數據顯示:月平均臨床乳房炎為1.4%(0.8%-1.9%),體細胞平均數為17.2萬(16.1-26.5萬),大罐奶樣微生物平均數為0.4萬(0.1-0.8)。舍內室溫15-26攝氏度,使用沼渣為墊料;頭胎發病110頭(頭胎泌乳??倲?184頭),蚊蠅防控做得不好,臥床和牛體上可見蒼蠅?,F附上臨床癥狀數張,參見圖1,煩請百忙之中撥冗幫助我們解決。


    一、如何破解?

    該場泌乳牛3400余頭,既往近19個月期間(2019年2月至2020年8月)原奶衛生質量統計數據顯示:月平均臨床乳房炎為1.4%(0.8%-1.9%),體細胞平均數為17.2萬(16.1-26.5萬),大罐奶樣微生物平均數為0.4萬(0.1-0.8萬);即使在全球同行業對擂,業績也屬上乘表現。雖然從所發照片可看出臥床管理仍有需要改善之處,但因長達近19個月期間臨床乳房炎月平均發病率僅為1.4%(0.8%-1.9%),優于行業標準1.5%,所以病因學破解突破點并不可完全歸咎于憩息環境差和臥床管理不到位。該病自7月26日首先發病10頭,至8月1日迅速在全群蔓延擴散,具有鮮明的傳染性極強和極快特征,這自然大大壓縮了大海撈針似漫天診斷遐想,而應將關注重點放在:究竟哪些傳染性致病微生物可造成奶牛乳頭及其鄰近乳區皮膚損傷?
    
    二、哪些傳染性致病微生物可造成乳頭及其鄰近乳區皮膚損傷?

    造成乳頭及其鄰近乳區皮膚損傷的傳染性致病微生物可細分為如下九類:

    1、牛乳頭瘤病毒。

    2、牛皰疹病毒2型/4型(Bovine Herpes Virus 2: BHV-2; Bovine Herpes Virus 4: BHV-4)。

    3、牛痘病毒。

    4、偽牛痘病毒。

    5、口蹄疫病毒。

    6、牛毛癬菌。

    7、金黃色葡萄球菌。

    8、前庭口炎病毒。

    9、厭氧壞死梭形菌。

    對照以上9類不同傳染性致病微生物造成乳頭及其鄰近乳區皮膚損傷特征,以及感染至發病潛伏期長短,可基本鎖定屬牛皰疹病毒2型/4型感染損傷(潛伏期4-10日)。又由于牛皰疹病毒4型屬γ皰疹病毒亞科新成員,對牛類動物血管內皮細胞、乳腺組織、子宮內膜、胎兒組織均有很強親和力,并造成相應嚴重損傷,而該場罹病牛并不伴發這些關聯臨床癥狀,故可暫時排除牛皰疹病毒4型感染假設。不過,牛皰疹病毒2型感染損傷常致乳頭及其臨近乳區皮膚表層潰瘍,臨床特征與病程長短與該場罹病牛所見吻合。1957年在非洲首次發見牛皰疹病毒2型感染乳頭及其臨近乳區臨床病例,稱為牛皰疹病毒2型乳頭炎(Bovine Herpes Mammillitis: BHM);繼后不少國家相繼有此病報道,我國于2000年9月初次確診本病,隨后各地陸續零星發生?;?,初步診斷為牛皰疹病毒2型乳頭炎。為進一步確證初步診斷,現場采集10頭痊愈牛病變部位結痂樣品送四川農業大學曹隨忠校長團隊(反芻動物疾病研究中心)應用PCR技術檢測牛皰疹病毒2型。

    三、四川農業大學檢測結果如何?

    檢測報告

    1、樣品信息

   (1)收樣日期:2020年8月20日。

   (2)樣品種類:10份痂皮,參見圖2。

    2、檢測要求

    檢測牛皰疹病毒2型。
    3、樣品處理

    對10份液體樣品提取DNA,同時將樣品中的痂皮混合成兩個樣品研磨后提取DNA。進行牛皰疹病毒2型特異性PCR驗證。

   (1)檢測用品信息,參見表1。

   (2)檢測引物信息,參見表2(牛皰疹病毒2型參考序列號為M21628)。


    4、PCR檢測結果

    參見圖3.

    5、初步診斷結論

    PCR結果顯示5號和6號樣品出現目的條帶,約為500bp,與目的條帶大小一致,說明樣品中存在牛皰疹病毒2型;但條帶暗淡且模糊,可能緣于樣品病毒載毒量較小或采樣時間不恰當等原因造成DNA模板質量不高,影響PCR過程。牛皰疹病毒2型在皰疹液內含量很高,在發病初始階段采取皰疹液樣品容易分離和鑒定病毒,但供檢測的10個樣品均采自罹病牛損傷乳頭及其鄰近乳區業已痊愈的皮膚痂。

    四、中美兩國診斷本病效率如何?

    我曾在美國明尼蘇達州政府獸醫診斷實驗室(全美每個州均設置本州獸醫診斷實驗室)工作多年,本病從2020年8月11日報告,至8月26日初步破解,歷時15日,而我們美國同行大約只需不足4日即可破解,現將兩國破解流程中各環節時長差異藉表3簡潔說明。

    五、如何正確治療牛皰疹病毒2型乳頭炎?

    因屬病毒感染致病,故本病暫無特效療法,只能對癥治療和采取支持療法。對業已發病牛,可選下列任何一種溶液涂敷患部:10%甘油聚維酮碘、碘甘油,或10%甘油去腐生肌散;如欲防止夏季蚊蠅騷擾,可涂敷萬金油或薄荷油;早期發病痛感強烈患??山o予非固醇類抗炎藥物緩解;這些處理均可加快愈合過程;一般輕癥病例5-7日即可痊愈,嚴重病例則需要2-3周左右時間恢復;應始終警惕繼發臨床乳房炎風險。

    六、如何正確預防牛皰疹病毒2型乳頭炎?

    牛皰疹病毒2型乳頭炎目前尚無市售特異疫苗可用。比較可行的現場有效預防措施如下:

    1、設立隔離圈留置罹病牛并最后擠奶。

    2、注意擠前用含游離碘5000PPM藥浴液充分浸泡乳頭到位并滯留逾30秒。

    3、用含70%酒精濕紙巾擦干凈乳頭后再套杯。

    4、夏季應用10%甘油含游離碘10000PPM后藥??;冬季可使用高含量脂肪酸乳頭防凍液。

    5、加強夏季消滅蚊蠅工作。

    6、一旦牛群感染本病,即非常難以徹底凈化。因本病常由頭胎牛始發,所以需要特別加強關注頭胎新產牛,一旦發現癥狀即刻隔離和治療,避免進一步在全群擴散。

    七、還需要知道牛皰疹病毒2型乳頭炎哪些信息?

    1、皰疹病毒傳染病是如何被人類逐漸認識與理解的?

    皰疹病毒感染疾病早在古希臘時期就已流行,系已知最古老的性傳播感染疾病之一,西歐各國史書曾記錄了本病的基本癥狀和諸多治療措施,但當時治愈率并不高;皰疹病毒傳染病僅只是在近數百年方被人類逐漸認識和透徹理解。眾所周知,希波克拉底(公元前460-370)曾描述了皰疹單純病變的皮膚傳染病,皰疹這個詞取自希臘文“皰疹(Herpes)”,意思“蠕變或爬行”,形象地描述了皰疹皮膚病變的傳播方式和性質。甚至莎士比亞也熟悉復發性皰疹單純病變及其傳播特點。在《羅密歐與朱麗葉》中,莎士比亞如此描寫瑪布王后:“歐爾女士們的香唇直接交互親吻如醉如癡,其中憤怒的瑪布王后罹患水泡瘟疫,因為聚集者的呼吸和招待糖果均被污染?!?然而,直到1893年,法國科學家埃米爾·維達爾才通過實驗證明皰疹可從一個人傳染給另一個人。

    2、牛皰疹病毒能造成牛類動物哪些疾???

    幾類皰疹病毒科亞科病毒如α皰疹病毒和γ皰疹病毒常感染牛致嚴重疾病,如大家熟悉的牛皰疹病毒1型(BHV-1)常致牛傳染性鼻氣管炎、傳染性膿皰性外陰陰道炎和傳染性龜頭炎。而牛α皰疹病毒2型(即牛皰疹病毒2型)與人類皰疹病毒1型抗原性相關,常致感染牛發生兩種明顯獨特截然不同疾?。?br>
   (1)類似于牛傳染性皮膚結節?。ㄓ啥徊《疽穑┑膫闻Fつw結節病,這兩種牛皮膚結節病臨床難以鑒別診斷。

   (2)牛潰瘍性乳頭炎,也稱牛皰疹乳頭炎,或牛皰疹病毒2型乳頭炎。

    3、牛皰疹病毒2型傳染病流行情況如何?

    牛皰疹病毒傳染病分布于世界各地。偽牛皮膚結節病首先在南非被報道,繼之向非洲中部和北部、東歐、西亞、中亞、中國以及美國和澳大利亞逐漸擴散。牛皰疹病毒2型乳頭炎臨床病例則在英國、愛爾蘭、保加利亞、意大利、法國、澳大利亞、美國、加拿大、盧旺達、布隆迪、贊比亞、巴西、巴基斯坦和中國均有零星報道。同時,比利時、荷蘭、新西蘭、南非和納米比亞亦獲得了牛皰疹病毒2型感染的血清學證據。新近,在非洲、亞洲和匈牙利亦報道牛皰疹病毒2型抗體檢測或幾種無癥狀野生動物該病毒DNA檢測的陽性結果,表明牛皰疹病毒2型感染遠較臨床病例更多。德國2020年5月24日宣布,依據該國6801頭奶牛普查結果,至少目前德國奶牛群不存在牛皰疹病毒2型感染風險。

    4、牛皰疹病毒2型傳染途徑如何?

    迄今為止,牛皰疹病毒2型自然傳染模式尚未透徹了解清楚,除直接接觸傳染外,還可經擠奶和蚊蠅叮咬傳染,如吸血廄蠅。假如乳頭皮膚完整,則牛皰疹病毒2型不易侵襲致??;因此,乳頭皮膚損傷常為誘發本病的風險因子之一。牛皰疹病毒2型除經感染牛破損皮膚排出外,也能經口鼻甚至陰道排出。此外,在健康牛三叉神經節也曾檢出過牛皰疹病毒2型?;貧w該奶牛養殖集團屬下該奶牛場,我們并未破解該場牛皰疹病毒2型原發何處。

   (曹隨忠  四川農業大學 教授;徐雙 某奶牛養殖集團 原奶質量總監;蘆彪 四川農業大學反芻動物疾病研究中心 碩士研究生;張廷青 博士)

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